Gliconjugados de Propionibacterium acnes com atividade imunomodulatoria sobre celulas peritoneais de camundongos

Abstract

Objetivos: Purificacao e caracterizacao de glicoconjugados da Propionibacterium acnes e avaliacao de seus efeitos sobre a funcao fagocitica, ativacao, expressao de moleculas de superficie de celulas pertioneais de camundongos, e sobre a resistencia desses animais frente a infeccao por Klebsiella pneumoniae . Metodos: Foi purificado a partir da bacteria, um polissacarideo soluvel por extracao fenolica e um glicolipideo por tratamento com C:M e LP:A, separacao em coluna DEAE-Sephadex e purificacao em HPTLC. Camundongos BALB/c foram tratados com dose unica, padronizada por nos, de 25 mg de polissacarideo ou glicolipideo por via intraperitoneal. Apos 24 horas, celulas peritoneais foram retiradas e avaliadas quanto a fagocitose de hemacias opsonizadas ou de leveduras, e expressao de moleculas de superficie por citometria de fluxo. Fizemos tambem a dosagem da liberacao de NO e TNF-a, por estimulacao in vitro, nas celulas dos animais tratados ou do grupo controle utilizando os seguintes estimulos: polissacarideo, glicolipideo, LPS e IFN-g ou a combinacao entre os mesmos. Empregamos o mesmo tratamento dos animais citados acima para avaliarmos a resistencia a infeccao por K. pneumoniae. Resultados e Conclusoes: Tanto o polissacarideo, como o glicolipideo purificados por nos, aumentou significativamente a fagocitose por macrofagos peritoneais de hemacias opsonizadas e de leveduras quando comparados ao grupo controle tratado com salina. A modulacao da atividade fagocitica foi observada pelo aumento do numero de macrofagos que fagocitaram e dos receptores de superficie Fcy e manose, por detectarmos um numero elevado de hemacias e leveduras dentro das celulas. 0 aumento do numero de macrofagos tambem foi visto avaliando a expressao do receptor para C3b do complemento (CD11 b/CD18) cuja a expressao se encontra aumentada nestas celulas. 0 tratamento com o polissacarideo induziu um discreto aumento de linfocitos B convencionais e com o glicolipideo, um aumento da populacao celular CD3+CD4-CD8-. Pudemos observar sintese elevada de NO e TNF-a quando celulas obtidas de camundongos tratados com P. acnes foram estimuladas in vitro com os glicoconjugados. Verificamos ainda, resistencia aumentada a K. pneumoniae nos animais tratados com os glicoconjugados. Nossos resultados deixam claro a atividade imunomoduladora desses componentes bacterianos