Efeitos das cininas em células mesangiais de camundongo

Abstract

A bradicinina (BK) age em celulas mesangiais.(CM) induzindo aumento da concentracao citosolica de calcio [Ca++]i, contracao, secrecao e endocitose de particulas, sintese e proliferacao celular. As CM, por sua vez, exercem um papel fundamental no controle da hemodinamica glomerular. Este estudo analisa a acao da BK e analogos sobre CM imortalizadas de camundongo (CMIC), com enfoque especial as variacoes da [Ca++]i, avaliadas por espectrofluorimetria, empregando o corante fura-2-AM. Os resultados foram expressos como a razao entre [Ca++]i obtida/[Ca++]i basal. A BK (O,1 mM) induziu aumentos importantes na [Ca++]i de CMIC (4,70n0,27, N=28), e comportamento similar foi apresentado pelo agonista seletivo de receptores do subtipo B2 (B2R), Tyr8 -BK (O,1 mM, 3,34n0,48, n=7), mas nao pelos agonistas seletivos de receptores B1 (B1R), des-Arg9-K (O,1 mM, 1,12n0,04, N=8) e des-Arg10-calidina (Kal) (O,l mM, 1,45n0,08, N=11). Dessensibilizacao de respostas foi observada apos administracao consecutiva de BK e Tyr8-BK e vice-versa, mas nao entre BK e des-Arg10-Kal. Enquanto o antagonista de B2R, HOE 140(O,1 mM), reduziu significativamente a acao da BK (5,09n0,30, N=6 vs. 1,57n0,12, N=7, p<O,OOl), nenhum efeito inibitorio foi detectado na presenca do antagonista de BlR des-Arg9-[Leu8]-BK (l mM). A incubacao prolongada (24 h) de CMIC com lipopolissacarideo de E. coli (LPS; 100 mg/mL) associado ou nao ao fator de necrose tumoral-a (TNF-a; 10 ng/mL) nao alterou os perfis das respostas da BK ou dos agonistas de B1R empregados. Procedimento semelhante induziu aumentos na producao de oxido nitrico (NO; avaliada pelo metodo de Griess) em CMIC, com discreta potencializacao desse efeito apos administracao de BK, des-Arg10-Kal ou ambos na presenca do TNF-a, mas nao do LPS. Os aumentos da [Ca++]i induzidos pela BK foram fortemente dependentes de calcio externo, com um componente da resposta secundario a mobilizacao de estoques intracelulares. Durante deplecao do calcio tanto do meio extra como intracelular, as respostas da BK nao foram recuperadas mesmo apos restauracao adequada do calcio externo, demonstrando que o influxo desse ion era dependente da ativacao das reservas intracelulares. O efeito da BK foi ainda abolido pela heparina (l mg/mL), um antagonista competitivo de receptores de inositol trifosfato (IP3) (l,85n0,15 vs. 1,13n0,02, n=4, p=O,OOl). Nenhuma alteracao significativa nas respostas da BK foi registrada na presenca dos inibidores verapamil (30 mM ...(au)