Sintese de peptidios ciclicos analogos da sequencia C-terminal da angiotensiba I e da bradicinina e ensaios com enzima conversora da angiotensina I e catepsina B

Abstract

O estudo de peptideos ciciicos envolve aspectos importantes nas modificacoes de conformacao de substratos ou inibidores de proteases obtidas pela restricao de liberdade conformacional dos peptideos, principalmente no caso de pequenos peptideos ciciicos. Apresentamos neste trabalho a descricao da sintese de peptideos ciclicos derivados da sequencia Phe-His-Pro-Phe-HisPro, analoga da terminacao C-terminal da Angiotensina I e da sequencia GiyPhe-Ser-Pro-Phe-Arg, que corresponde ao segmento N-terminal da Bradicinina. Os peptideos assim obtidos foram estudados como substratos e inibidores da enzima conversara da angiotensina I (ACE) e da catepsina B. Embora sejam enzimas bastante distintas, elas tem em comum a atividade carboxidipeptidasica Estudamos as condicoes de ciciizacao da sequencia FHPFHP. e obtivemos polimerizacao significativa ate a formacao de peptideos com quatro unidades do peptideo de partida, seguida de ciclizacao. Isto foi obtido empregando a difeniifosforil azida (DPPA) na presenca de NaHCO3 em DMF. Outros metodos foram utilizados para a ativacao da caboxila do peptideo para efetuar a ciclizacao, tais como 1- hidroxi-7-azabenzotriazol (HATU) e 2-(lHbenzotriazol-lyl)-1,1,3,3 tetrametiluronium tetrafluoroborato (TBTU) na presenca de l-hidroxi-benzotriazoi e N,N diisopropiletiamina (DIEA). Estes reagentes foram bastante eficientes somente na obtencao do peptideo (FSPFRG) Os peptideos c(FHPFHP)2 , c(FHPFHPFHP) , c(FHGFHG), c(FHGFHG)2 e C(FSPFRG) assim como seus correpondente lineares foram ensaiados como substratos e inibidores da ACE e da catepsina B. Os peptideos lineares sao substratos para ACE e os ciclicos sao resistentes. Ambas as series de peptideos inibem a ACE com KI na ordem de 10-5 M. A catepsina B nao mostrou interecao com qualquer dos peptidos obtidos. Discutimos os resultados obtidos com a ACE e catepsina B com base na conformacao dobrada, tipo dobra O ou y que as sequencias C-terminal da Angiotensina I e Bradicinina sao descritas adotar em solucao