Estudo da organização nuclear durante o ciclo de vida do Trypanosoma cruzi

Estudo da organização nuclear durante o ciclo de vida do Trypanosoma cruzi

Author Marques-Porto, Rafael Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Schenkman, Sérgio Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract A estrutura da cromatina, alem de sua funcao de empacotar o genoma das celulas eucarioticas, exerce um importante papel de reguladora da expressao genica. Protozoarios parasitas sofrem transformacoes consideraveis ao longo de seus ciclos de vida.. Assim, e possivel que alguns genes sejam regulados por alteracoes da estrutura da cromatina nestes organismos. Com o objetivo de iniciar estudos para enfocar esta hipotese, estudamos a organizacao nuclear do Trypanosoma cruzi ao longo do seu ciclo de vida, atraves da reacao com um anticorpo monoclonal, Acm 3F4, especifico para um antigeno nuclear. Realizamos experimentos de imunofluorescencia indireta com as formas epimastigotas, tripomastigotas, amastigotas intracelulares e tripomastigotas sanguineos. Verificamos que o Acm 3F4 marca diferentemente os nucleos destes estagios do ciclo de vida do T. cruzi. Em amastigotas e amastigotas, formas que se replicam, a marcacao e forte e acompanha o formato esferico do nucleo, excluindo o que se presume ser o nucleolo. Ja nas formas tripomastigotas e tripomastigotas metaciclicas, que nao se replicam, a marcacao e fraca e se estende por todo o nucleo, de formato alongado, sem que se observe uma area correspondente ao nucleolo. Quando as formas tripomastigotas sao tratadas com detergente antes de serem fixadas, seus nucleos sofrem alteracao estrutural e passam a apresentar forte marcacao. O epitopo reconhecido pelo Acm 3F4 e extraido da matriz nuclear com NaCl 1 M e pode ser reconstituido a partir da adicao de fracoes insoluveis com detergentes, extraidas com NaCl 1 M. O antigeno tambem pode ser extraido atraves do tratamento com DNase e tripsina. Concluimos que as alteracoes morfologicas, observadas na organizacao nuclear diferencial do T. cruzi ao longo do seu ciclo de vida, sao acompanhadas da exposicao de antigenos associados a matriz nuclear
Keywords Anticorpos monoclonais
Trypanosoma cruzi
Parasitologia
Language Portuguese
Date 1997
Published in São Paulo: [s.n.], 1997. 78 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 78 p.
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/15355

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