Análise proteônica comparativa dos efeitos neurotóxicos dos agentes quimioterápicos cisplatina e carboplatina sobre célula epitelial do tubulo proximal humano(HK-2)

Análise proteônica comparativa dos efeitos neurotóxicos dos agentes quimioterápicos cisplatina e carboplatina sobre célula epitelial do tubulo proximal humano(HK-2)

Alternative title Comparative proteomic analysis of the epithelial cells of human proximal tubule (HK-2) before the nephrotoxic effects of chemotherapeutic drugs cisplatin and carboplatin
Author Perez, Juliana Dinéia Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Casarini, Dulce Elena Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract Quimioterápicos, como a cisplatina (CPT, cis-diaminodicloroplatina II) e seu análogo carboplatina (CB, diamina - 1,1 – ciclobutanodicarboxilato - platina II), são cada vez mais utilizados como drogas antitumorais, altamente eficazes no tratamento de diversos tipos de neoplasias. Estudos demonstram que células do túbulo proximal renal representam o primeiro alvo para diversas nefrotoxinas, tais como os quimioterápicos. Sendo assim, utilizamos como modelo de estudo a cultura de célula imortalizada epitelial do túbulo proximal renal de humanos (HK-2). Nosso objetivo foi identificar por meio de análise por eletroforese bidimensional e técnicas proteômicas, proteínas das células HK-2 que podem apresentar-se sub ou superexpressas quando estas células são submetidas aos tratamentos com CPT e CB e que, por consequência desta alteração, estejam envolvidas no processo de nefrotoxicidade. As células HK-2 foram divididas em três grupos: Controle (n=8), tratadas com CPT (n=8) e com CB (n=8), separadamente. Utilizamos tratamentos com 100 µM de CPT e 50 µM de CB. Após técnica de eletroforese bidimensional (2-DE), densitometria e análise dos géis de cada grupo de estudo e análise no programa PdQuest (Bio-Rad, EUA), quantitativa e qualitativamente, detectamos um total de 373 spots: 124 spots para CT, 122 para CPT e 127 para CB. Desse total, 81 spots tiveram sua concentração protéica alterada. Por análise qualitativa, a proteína da subunidade alfa da síntese de ATP (ATPA) e a serinohidroximetiltransferase (GLYM) apareceram apenas nos géis do grupo CPT. Já o fator alfa de elongação (EF1A1) apareceu somente no grupo CT, desaparecendo quando as células foram tratadas com CPT e CB. Quando da análise das proteínas que sofreram alterações quantitativas, verificamos que duas proteínas, a tioredoxina dependente de peróxido (PRDX3) e a alfa-enolase (ENOA) desapareceram nos géis do grupo CPT, sendo expressos somente nos géis dos grupos CT e CB. Heat shock protein 70 kDa (Hsp70) não apareceu nos géis do grupo CT, sendo detectada apenas nos grupos CPT e CB. Duas proteínas foram detectadas nos três grupos de estudo, a heat shock protein 60 kDa (Hsp60) e a proteína homóloga headcase (HDC). A detecção das proteínas do epitélio do túbulo proximal renal que estão alteradas quando submetidos ao tratamento com CPT e CB, poderá gerar ferramentas importantes para o desenvolvimento de novos medicamentos, que poderia reduzir complicações renais decorrente dessa nefrotoxicidade em pacientes com câncer que fazem tratamento com quimioterápicos..
Keywords Proteômica
Espectrometria de massas
Biomarcadores farmacológicos
Language Portuguese
Date 2009
Published in São Paulo: [s.n.], 2009. 148 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 148 p.
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/10368

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